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切口酶扩增反应(nicking enzyme amplification reaction，wlrb8204kit试剂盒价格， near)是一种基于切刻内切酶切割特性的恒温扩增方法，详细原理可参考啥---可10分钟完成---分子检测？。其使用的酶有两种：切刻内切酶：如nt.bstnbi切刻内切酶，该类酶不同于常规---性内切酶，其识别特定序列后仅在dna其中一条链上切割形成缺口，mirawlrb8204kit试剂盒价格，并暴露出游离的3端；dna聚合酶：如vent (exo-) dna聚合酶或bst dna聚合酶，用于dna链合成，同时具有链置换功能。

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尿dna糖基化酶尿dna糖基化酶(udg酶)又称尿-n-糖基化酶(ung酶)，dna型wlrb8204kit试剂盒价格，可水解含尿的单链和双链dna释放出游离尿，而对rna无活性，与dutp搭配使用，可建立成pcr防污染体系。其原理如下：在pcr体系---dttp部分或全部替换为dutp后，使得反应生成含有du碱基的扩增产物，这些扩增产物不同于天然模板，在进入含有udg酶的反应体系时，可被udg酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的n-糖基键，而经切割后的dna链在碱性或高温条件下易于断裂降解，从而失去被当作模板再扩增的能力，因此可防止扩增子污染如下图。市面上的udg酶主要有普通型和热敏型，其中热敏型udg酶在室温条件下即可催化反应，胶体金试纸条型wlrb8204kit试剂盒价格，50℃以上加热可使其灭活，防止其降解后续pcr形成的含du扩增产物。虽然udg/dutp体系具有防污染功能，但在实际测试中还得---pcr的效率和灵敏度。一方面需---pcr扩增产物掺入足够量的尿碱基，从而可被udg有效切割；另一方面也需要---反应体系添加的dutp不会明显影响pcr效率，因此dttp和dutp的佳比例需通过优化确定。