北京立博泰业-基础型WLRB8207KIT试剂盒公司

恒温扩增试剂盒

本试剂盒可以用于rt-lamp等温扩增，rt-lamp即逆转录和loop-mediated isothermal amplification(环介导等温扩增)的结合，wlrb8207kit试剂盒公司，专门用于快速扩增rna。lamp是2000年才出现的一种新颖的等温---扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的dna聚合酶，胶体金试纸条型wlrb8207kit试剂盒公司，在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特---和检测范围等指标上能---甚至优于rt-pcr技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、---、---等病原体的快速检测。

恒温快速扩增试剂盒常用酶原料

尿dna糖基化酶尿dna糖基化酶(udg酶)又称尿-n-糖基化酶(ung酶)，可水解含尿的单链和双链dna释放出游离尿，而对rna无活性，基础型wlrb8207kit试剂盒公司，与dutp搭配使用，可建立成pcr防污染体系。其原理如下：在pcr体系---dttp部分或全部替换为dutp后，使得反应生成含有du碱基的扩增产物，这些扩增产物不同于天然模板，在进入含有udg酶的反应体系时，可被udg酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的n-糖基键，而经切割后的dna链在碱性或高温条件下易于断裂降解，从而失去被当作模板再扩增的能力，因此可防止扩增子污染如下图。市面上的udg酶主要有普通型和热敏型，其中热敏型udg酶在室温条件下即可催化反应，50℃以上加热可使其灭活，防止其降解后续pcr形成的含du扩增产物。虽然udg/dutp体系具有防污染功能，但在实际测试中还得---pcr的效率和灵敏度。一方面需---pcr扩增产物掺入足够量的尿碱基，从而可被udg有效切割；另一方面也需要---反应体系添加的dutp不会明显影响pcr效率，因此dttp和dutp的佳比例需通过优化确定。