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恒温快速扩增试剂盒应在怎样的温度下使用?

标准的era扩增试剂盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于rt试剂盒,我们建议客户在40℃下运行反应,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。

立博泰业——多年销售恒温快速扩增试剂盒,我们公司坚持用户为-,想用户之所想,急用户之所急,以诚为本,讲求信誉,以产品求发展,以求生存,我们热诚地欢迎各位同仁合作共创。




恒温扩增试剂盒产品特点


产品特点:

1.高特-,由于同时使用4-6条特异引物,所以特-比rt-pcr更高。

2.高扩增效率,扩增效率可达到10e9-10e10,比pcr灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的rna分子

3. 65℃左右完成rt和lamp扩增,不需要贵重的热循环仪。

4. 即开即用,包含了除引物和模板rna外的所有成份,十分方便。

5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光pcr等仪器。

6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。








恒温快速扩增试剂盒常用酶原料有哪些?

逆转录酶逆转录酶又称反转录酶,是一种rna介导的dna聚合酶,其反应过程中体现出三种功能为:以rna作为模板合成互补dna链 (complementary dna, cdna),形成rna:cdna杂交链;发挥rnase h活性,降解rna:dna杂交链中的rna模板;以cdna作为模板合成第二链dna,形成双链dna如下图。其中,rnaseh活性是逆转录酶的一个内在特性,可在合成过程中同时切割rna:cdna杂合链中的rna模板,该特性可能降低逆转录效率,因此在实际应用中,常采用人工改造后的低或无rnase h活性的逆转录酶。常用的逆转录酶有amv和m-mlv,amv分离自禽类成髓细胞瘤-(avian myeloblastosis virus, amv),m-mlv逆转录酶分离自莫洛尼氏鼠-(moloney murine leukemia virus, mmlv),前者热稳定性优于后者,但amv逆转录酶的rnaseh活性也-,不利于长片段cdna合成。市面上多使用经基因工程改造过的m-mlv逆转录酶,其热稳定性改进,可在50℃左右工作,同时rnase h活性进一步减弱,提高了其逆转录效率。




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