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北京立博泰业科技有限公司
联系人:张经理
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主营:
地址:北京市海淀区天秀路10号中国农大国际创业园3号楼5层5046
产品特点:
1.高特-,由于同时使用4-6条特异引物,所以特-比rt-pcr更高。
2.高扩增效率,扩增效率可达到10e9-10e10,比pcr灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的rna分子
3. 65℃左右完成rt和lamp扩增,不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用,包含了除引物和模板rna外的所有成份,十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光pcr等仪器。
6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
原理概述:
本试剂盒基于一种常温恒温-快速扩增技术:在恒温条件下42 °c,特殊修饰的反转录酶利用特-引物dna和模板rna合成cdna链,反应体系中的重组酶、单链dna结合蛋白和dna聚合酶以新合成的cdna链为模板进行快速-扩增反应。适用于实验室级别的rna扩增以及其他检测用途的rna扩增使用。
产品特点:
本试剂盒具有灵敏度高、特-强、反应时间短仅需30 mins等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。
本试剂对设备要求低,金属浴、水浴锅等即可进行反应操作,无需购买pcr扩增仪等价格高昂的专属设备。
恒温扩增的方法多种多样,其对应的酶体系也各有差别,且一般为多酶体系,在酶原料选择上相比pcr复杂,下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。
lamp相关酶环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, lamp)所用酶主要为具有链置换功能的dna聚合酶,详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为bst dna聚合酶,用于dna链合成,同时具有链置换功能;若检测模板为rna,则可加入逆转录酶配制成rt-lamp反应体系。
rpa相关酶
重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification, rpa)是一种多酶协作的反应体系,详细原理可参考充满-力的恒温扩增技术:rpa、rca、sda、hda。该体系反应酶包含三种:重组酶:可与引物结合形成复合体,定位至与引物同源的靶序列,促使引物与模板结合,同时帮助dna解链,以便启动扩增;单链dna结合蛋白:可与被置换出的dna单链结合,稳定单链结构;dna聚合酶:如bsu dna聚合酶,用于dna链合成,同时具有链置换功能。对于rna模板,需在反应中加入逆转录酶形成rt-rpa体系;若利用标记探针进行检测,还需加入-酶对探针序列进行切割,常用-酶有-内切酶 iv(endonuclease iv, nfo)和-外切酶 iii(exonuclease iii, exo),或者可与crisps/cas系统搭配使用。